成年大鼠心肌细胞的分离和培养

建立获得较高比例的活性成年大鼠心肌细胞的分离和培养方法。方法：Langendorff灌流，胶原酶消化分离钙耐受成年大鼠心肌细胞，加血清培养。光镜观察，结合形态学和台盼蓝染色评价心肌细胞。
结果：分离的活性心肌细胞比率约70％-80％，杆状、横纹清晰。加血清贴壁培养的细胞逐渐发生形态学改变。
结论：通过本方法可以对成年大鼠心肌细胞进行良好的分离培养。



相关建材词条解释：

心肌细胞

根据它们的组织学特点、电生理特性以及功能上的区别，粗略地分为两大类型：两类心肌细胞分别实现一定的职能，互相配合，完成心脏的整体活动。一类是普通的心肌细胞，包括心房肌和心室肌，含有丰富的肌原纤维，执行收缩功能，故又称为工作细胞。工作细胞不能自动地产生节律性兴奋，即不具有自动节律性；但它具有兴奋性，可以在外来刺激作用下产生兴奋；也具有传导兴奋的能力，但是，与相应的特殊传导组织作比较，传导性较低。另一类是一些特殊分化了的心肌细胞，组成心脏的特殊传导系统；其中主要包括P细胞和哺肯野细胞，它们除了具有兴奋性和传导性之外，还具有自动产生节律性兴奋的能力，故称为自律细胞，它们含肌原纤维甚小或完全缺乏，故收缩功能已基本丧失。还有一种细胞位于特殊传导系统的结区，既不具有收缩功能，也没有自律性，只保留了很低的传导性，是传导系统中的非自律细胞，特殊传导系统是心脏内发生兴奋和传播兴奋的组织，起着控制心脏节律性活动的作用。

大鼠

大鼠1．大鼠性哺乳纲，啮齿目，鼠科，大鼠属动物。2．繁殖快。大鼠2月龄时性成熟，性周期4天左右，妊娠期20（19～22）天，哺乳期21天，每胎产仔平均8只，为全年、多发情性动物。3．喜啃咬、夜间活动、肉食，白天喜欢挤在一起休息，晚上活动大，吃食多，因此白天除实验必须抓取外，一般不要抓弄它。食性广泛，喜吃各种煮熟的动物肉。对光照较敏感。4．无胆囊：大鼠、鸽、鹿、马、驴、象等动物没有胆囊，它们的总胆肝管括约肌的阻力很少，肝分泌的胆汁通过总胆管进入十二指肠，受十二指肠端括约肌的控制。5．不能呕吐：因此药理实验时应予注意。6．垂体一肾上腺系统功能发达，应激反应灵敏。行为表现多样，情绪敏感。7．视觉、嗅觉较灵敏，做条件反射等实验反应良好，但对许多药物易产生耐药性。8．大鼠血压和血管阻力对药物反应敏感，但对强心甙的作用较猫敏感性低671倍。9．肝脏再生能力强，切除60～70%的肝叶仍有再生能力。10．对营养、维生素、氨基酸缺乏敏感，可发生典型的缺乏症状。体内可以合成维生素C。11．对炎症反应灵敏。它的眼角膜无血管。12．生长发育期长，长骨长期有骨骺线存在，不骨化。13．成年雌鼠在动情周期不同阶段，阴道粘膜可发生典型变化，采用阴道涂片法（YaginalSmearTest）来观察性周期中阴道上皮细胞的变化，可推知性周期各个时期中卵巢、子宫状态与垂体激素的变动。大鼠